セル部温度制御機能付き検出器による分析信頼性の向上

蛍光検出器では，セル部の温度制御機能は信号の信頼性の向上に非常に重要です。それは蛍光が温度消光現象を持つためです。

［蛍光の温度消光現象］
蛍光は温度が上昇すると，分子間衝突が増大し，無輻射遷移失活の度合いが増大するため，その強度が低下する特性があります。　その特性の程度はサンプルによって異なり，常温付近で1℃の温度上昇につき約5%も蛍光強度が低下するものもあります。
従って，検出器のフローセル部へ流入する液温が高くなるほど，蛍光強度が低下します。　このため，室温の変化がある場合には，蛍光強度が変化し，その結果，サンプルの定量性，再現性に影響を与えます。

［液温の一定温調による効果］
次のデータは，アクリジンをサンプルとして，液の一定温調ありの場合（図2）となしの場合（図3）のクロマトグラム例を示しています。　一定温調なしの場合，室温が5℃変化するとピーク面積値は －17%変化していますが，一定温調ありの場合には，わずか0.64%の変化に抑えられており，蛍光強度の温度係数が大きなサンプルでも安定的な定量分析が可能になることがわかります。

［ベースラインの安定性］
より多くの成分を検出するためにＵＶ短波長領域でUV検出器を使用されるケースが増えていますが，短波長になるほど移動相自身の吸収も一般的に増加します。　この移動相の吸収スペクトルが温度で変化し，波長方向へシフトするので，特に吸収傾斜の大きな波長で検出している場合には，ベースラインが著しく不安定になります。　SPD-20A/20AVなどセル部温度制御機能付きUV検出器はセルに流入する液温を一定に制御するため，移動相の温度によるスペクトル変化を防ぎ，吸収傾斜の大きな波長でも安定した分析が可能です。

［信号の信頼性］
サンプルの吸収極大における吸光度値が温度により変化するため，信号の信頼性の点からもセル部の温調は有効です。　また，一波長で多成分を分析する場合，サンプルによっては吸収極大ではなく吸収傾斜で検出することになりますが，サンプルのスペクトルが温度で変化し波長方向へシフトするケースがあり，吸収極大で測定する場合に比べて，温度変化によるピーク高さや面積に変化が起き易くなります。　こういう場合にはさらに有効です。