MALDI-7090とSialoCapper-ID Kitを用いた遺伝子KOマウス血清由来N-結合型糖鎖解析

ユーザーベネフィット

- LC分離やシアリダーゼ酵素処理を行うことなく、質量分析のみからシアル酸結合様式異性体が判別できます。 - 糖鎖精製ビーズ“BlotGlyco®”と組み合わせることで、糖鎖精製とシアル酸の修飾安定化が一度に行え簡便です。 - MS2測定を併用することでより確実にシアル酸結合様式を判別でき、他の生化学的実験による検証の手間を省きます。

はじめに

タンパク質に対する糖鎖修飾は様々な生体現象に関与しています。特に糖鎖の非還元末端に存在するシアル酸は、その有無や結合様式がウイルス感染やがんとの関わりも指摘されるなど、重要な単糖として知られています。 シアル酸結合異性体の判別にはLC分離やシアリダーゼ処理が用いられていますが、標品が必要であったり複雑な糖鎖では判別が難しいなど技術的な課題があります。 近年、高感度・ハイスループットな質量分析(MS)が糖鎖解析に広く利用されるようになりましたが、シアル酸残基が分析途中で脱離しやすく、また質量の同じ結合異性体が区別できないといった本質的な問題がありました。 本稿では、シアル酸転移酵素KOマウスの血清糖タンパク質から切り出したN-結合型糖鎖を、シアル酸結合様式判別用安定化試薬キット“SialoCapper-ID Kit”を用いて誘導体化し、MALDI-TOF質量分析計でシアル酸の結合異性体判別を含めて解析した例1)をご紹介します。

2021.04.12