Ampdirect® アプリケーションデータ集
パラフィン切片からのPCR
PCR阻害物質に中和作用をもつAmpdirect
®
を使用して、パラフィン切片よりPCRを実施しました。
DNA精製時のサンプルロスがなく、微量サンプルより簡便に安定した結果を得ることができます。
溶解液 Final .
Tris･HCl pH8.0 20mM
EDTA 5mM
NaCl 400mM
SDS 0.3%
Proteinase K 200μg/ml
脱パラフィン処理→乾燥後、プレパラート
上の組織をかき取り溶解液に添加
（溶解反応：55℃、3時間）*
PCRプログラム .
95℃，10min
94℃，30sec
58℃，60sec
72℃，90sec
72℃，7min
40 cycles
M DNA 未染色切片 HE染色切片 M DNA 未染色切片 HE染色切片
コントロール 1 （174bp） コントロール 2 （234bp）
反応液調製
PCR
反応液（20μl系） .
2x Ampdirect
®
Plus 10μl
BIOTAQ
TM
0.5U
F-primer 1μM
R-primer 1μM
Distilled Water up to 20μl
AMPDIRECT® AMPDIRECT®
0.5μｌを反応液へ
脱パラフィン サンプル溶解
（キシレン・15分間）
＊今回溶解液50μLに2mm各の切片を溶解しました。
＊伸長反応を68℃および精製DNAからのPCRに比べ1分間プラス
することにより増幅効率の上昇が確認されております。
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