Ampdirect Ｒ アプリケーションデータ集
口腔粘膜からのPCR
各種PCR阻害物質の影響を抑える作用を持つ Ampdirect
®
（Buffer）と BIOTAQ
TM
（推奨酵素）を使用して
口腔粘膜細胞からのPCRを行いました。
⇒DNAの精製操作は不要となり、簡便、迅速なPCRが可能となります。
溶解液 Final
Tris･HCl pH8.0 20mM
EDTA 5mM
NaCl 400mM
SDS 0.3%
Proteinase K 200μg/ml
⇒溶解液量：500μl
反応条件：55℃、1時間
解液へ
PCRプログラム
95℃，10min
94℃，30sec
55℃，60sec
72℃，60sec
72℃，7min
40 cycles
PCR反応液（20μl系）
2x Ampdirect
®
Plus 10μl
BIOTAQ
TM
0.5U
primer-F 0.5μM
primer-R 0.5μM
Distilled Water up to 20μl
上清1μｌを反応液へ
カード1枚を
反応液へ
サンプル懸濁
AMPDIRECT ® AMPDIRECT ®
溶
上記溶解液500μｌに懸濁
① ② ③ ④ ⑤
408bp
①精製DNA
②溶解液処理サンプル（1μl）
③未洗浄FTA
®
カード（Φ1.25mm ・1枚）
④唾液（1μl）
⑤Negative Control
サンプル採取
口腔内を採取用綿棒にて
拭いサンプルを採取
FTA
®
カードへ
反応液調製
PCR
パンチング
サンプル塗布 *
Harris Uni-Core φ1.25mm
（Whatman社）
*カード上のDNAは室温で
10年以上保存可能
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