Ampdirect® アプリケーションデータ集
昆虫からのPCR
PCR阻害物質に中和作用をもつAmpdirect
®
を使用して、昆虫からのPCRを実施しました。
DNA精製時のサンプルロスがなく、ショウジョウバエの足1本のような微量サンプルからのPCRや体液直接PCRが可能となります。
溶解液 Final .
Tris・HCl pH8.0 20mM
EDTA 5mM
NaCl 400mM
SDS 0.3%
Proteinase K 200μg/ml
上記溶解液に組織片を添加
(溶解反応:55℃、3時間)
反応液(20μl系) .
2x Ampdirect
®
Plus 10μl
BIOTAQ
TM
0.5U
F-primer 1μM
R-primer 1μM
Distilled Water up to 20μl
PCRプログラム .
95℃,10min
94℃,30sec
58℃,60sec
72℃,90sec
72℃,7min
40 cycles
AMPDIRECT® AMPDIRECT®
0.5μLを反応液へ
サンプル溶解 反応液調製
PCR
※体液は溶解処理は行わず、
直接反応液に添加しました。
M 体液 足 Nega 足1本 1個体 Nega M
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カイコ ショウジョウバエ
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