糖類の分離法

スルホン化ポリスチレンゲルに金属対イオンとして，ナトリウム（Na型），カルシウム（Ca型），鉛（Pb型）などをもたせた充てん剤が用いられ，主として2糖類以下の糖類の分離に適しています。　この方法による糖類の保持は，主として糖類の水酸基と金属対イオンとの錯形成に基づくもので，糖類が金属対イオンの水和水と交換して生成した錯体の安定性と関係付けられます。　分離のベースにあるのは，排除限界分子量約1000のサイズ排除法なのですが，金属対イオンの種類と糖類のもつ水酸基の位置や数により同じ分子量の単糖類でも保持に差が出てきます。
Na型ではほとんどサイズ排除作用のため，グルコースとフルクトースが分離できる程度ですが，Ca型では糖アルコールが選択的に保持され，Pb型では糖アルコールの保持がさらに強くなり，一部単糖類相互分離も良くなります。
この方法で用いる移動相は水だけですので，環境にやさしい分離法と言えますが，逆に移動相による分離のコントロールはできません。

また，2糖類の相互分離が困難，Ca型やPb型ではカラム温度を80℃程度に設定する必要がある（アノマー分離によるピークの割れや崩れを防ぐため）点など注意が必要です。

単糖類からオリゴ糖までの分離に適しています。特に，オリゴ糖構成糖の1個1個の違いを識別することができますので，2糖類の相互分離も容易です。
分配法では，一般にシリカポリマー坦体にアミノ(プロピル)基を結合させた充てん剤が用いられます。　移動相はアセトニトリルと水の混合液が用いられ，水の比率が増えるほど溶出がはやくなります。　また，糖類の分子量が大きくものほど遅く溶出します。
この方法による糖類の保持は，固定相に「濃縮」された水に対する糖類の分配に起因するものと考えられます。　なお，固定相のアミノ基は糖類のアルデヒド基と反応してシッフ塩基を作りますので，特に五単糖（アラビノース，リボース等）ではピークが大きくテーリングすることがあります。　これは，移動相に塩を添加することにより抑制することができます。　また，単糖同士の相互分離には限界がありますのでご注意ください。

糖類のようなポリオキシ化合物は，ほう酸やほう酸塩と速やかに反応して負電荷をもつ錯体を形成します。　つまり，移動相にほう酸緩衝液を用いると，糖類を陰イオン交換で分離することが可能となります。
この方法は，単糖から2糖類の相互分離に優れた方法です。　特にほう酸緩衝液の濃度とpHを変化させるグラジエント法により，多成分を効率良く分離することができます。

以上，糖類の分離は案外と難しいものです。　目的成分と夾雑成分を考慮して，最適な分離モードを選ぶ必要があります。