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分析機器トップ ＞ サポート ＞ (旧)環境ホルモン可能性物質分析情報 ＞ 分析のQ&A

　＊本情報は1998年段階の旧情報です。過去のライブラリとして掲載しています。

  1. 環境ホルモン可能性物質分析に関する一般的な質問

  2. 環境ホルモン可能性物質全般の分析法に関する質問

  3. 前処理法に関する質問

  4. アルキルフェノールの分析に関する質問

  5. ビスフェノールAの分析に関する質問

  6. フタル酸エステル類の分析に関する質問

  7. エストラジオールの分析に関する質問

    1. β-エストラジオールを測定するときに使われる，ELISAはどのような分析方法ですか？
    ELISAはEnzyme-linked immunosorbent Assayの略で，原理は抗原抗体反応を利用し，酵素活性の変化を測定する手法です。　ここでは抗エストラジオール抗体固定化マイクロプレートに試料を加え反応させます。その後エストラジオール標識酵素と発色基質を加えて，濃度を測定します。　試薬メーカーからエストラジオール測定キットが市販されています。

    2. β-エストラジオールを測定する方法としてELISA法とGC-MS法とがありますが，どのように使い分けるのですか？
    環境中濃度測定に環境庁，建設省はELISA法を用いていました。　しかし，エストラジオール抗体に反応する別物質の存在があり，環境中濃度が高くなる傾向があります。　そこでGCMS特にNCIを用いる方法に変わりつつあります。

    3. β-エストラジオール分析はBSTFAでのTMSでもできるとのことでした。　その操作法は，ｔBDMS誘導体化の部分を「BSTFA添加後，40℃で60分間放置後，窒素により蒸発乾固させ，ウンデカン100μLを加える。」でよいですか？　またGCMSで測定する場合の，測定イオンはどうなりますか？
    β-エストラジオールの誘導体化ですが，基本的にはおたずねいただいた方法で充分です。　ただ最後ウンデカンでメスアップしていますが，これは他の溶剤(酢酸エチル，ヘキサン，ジクロロメタン等)の方が良いと思います。　ジメチル-t-ブチルシリル化を使う理由はM+はほとんど出ませんが，M-ブチルのイオンが比較的大きなピークとし検出され，この結果SIMの感度高上が期待できるためです。　しかし，TMS-エストラジオールでもかなりのピーク強度が得られるため，この方法を推奨しています。　またSIMに用いる質量(質量電荷比)ですが，M+である416とフラグメントイオン285を用いる事が出来ます。

    4. HPLCで内分泌撹乱物質の影響による男性，女性ホルモン動態を調査する予定です。　エストロゲン分析のページで，「抱合体の分解」とありますが，これは，硫酸抱合体のことですか？　また，具体的にはどのような方法で測るのでしょうか？
    ステロイドにはいろいろなタイプのものがあります。　その中にステロイドとある種の化合物が結合したものがあり，そのひとつに硫酸抱合体があります。　今回の環境庁の試験法では抱合体も対象に入れ，あえて抱合体をはずし，総エストラジオールとしています。　環境中にはエストラジオールそのものと，抱合体が共存しています。　しかし，下水処理等を行なうと抱合体が外れてしまうと言われています。　抱合体そのままをGCMSで測定する事は難しく，そのために外していると言った方が良いと思います。　抱合体のまま測定する場合はHPLC法と考えられますが，環境庁は微量，極微量のエストラジオールを測定する方法を検討しています。ELISA法は環境中濃度測定では，エストラジオール以外の共存物質も合計した状態となり，あまり適切な方法ではないとは思っています。　しかしGCMSのEi法では限界に近い状態で，NCi法，LCMS法等を検討しています。　HPLCでは感度，選択性の点で問題が生じるのではと考えています。

  8. その他の物質の分析に関する質問